常用人肝癌細胞系

1.SMMC-7721 人肝癌細胞株

SMMC-7721細胞系是于1977年建立，材料取自一名50歲男性原發性肝細胞癌HCC患者的手術切除標本進行體外培養而得。其生物學特性如下：細胞系生長較迅速穩定，在原代細胞開始傳代階段增殖緩慢，以后趨于穩定而迅速生長，細胞形態為上皮樣，貼壁生長，細胞的亞微結構形態符合癌細胞的一般特征，甲胎蛋白（a-fetoprotein, AFP）免疫熒光染色呈陽性；LDH同工酶譜的變化與肝癌細胞的一般特征一致；免疫缺陷小鼠體內可成瘤率高，動物異種后瘤結節經病理切片檢查，其組織形態和原手術切除標本類似。

2.Bel-7402 人肝癌細胞株

Bel-7402于1974年建立，來源于一位53歲男性肝癌患者的手術切除標木，屬于HCC。生物學特性如下：細胞增長迅速而恒定，6-7 d可傳代1次，細胞形態以多邊形，上皮樣占絕大多數，貼壁生長，細胞染色體中有一大而長的近端著絲點染色體，出現頻率高，是本株細胞的標記染色體；AFP免疫熒光反應陽性；LDH、 G6PD、TAT等酶代謝及細胞的超微結構基本上保持臨床人體肝癌的特性；異種接種后成瘤率高，3-4d 可成瘤，瘤塊組織學病理與臨床HCC相近。

3.MHCC97 人肝癌細胞株

MHCC97細胞系由上海醫科大學中山醫院建立，將一名我國39歲男性HCC患者的肝右葉轉移病灶的手術切除標本接種于裸鼠肝內建造出人肝癌裸鼠轉移模型（LCI-D20）而得。已證實，經過再次分離得到的MHCC97H、MHCC97L及HCCLM3 3種細胞株，依據它們的轉移特點，雖來源同一父系，但具有異質性，即具有不同的轉移潛能。

MHCC97人肝癌細胞系于1998年從裸鼠人肝癌轉移模型（LCI-D20）體外傳代培養獲得，該細胞系符合一般人惡性腫瘤的病理學和遺傳學特征，細胞呈上皮樣，貼壁生長，血清HBsAg、AFP高表達，成瘤率高且優先轉移的靶器官是肺，肺轉移率100%，故證實該細胞系為高轉移特性的人肝癌細胞系。

2001年，研究者從MHCC97細胞系中發現并分離出不同轉移潛能的2個細胞系MHCC97-H和MHCC97-L，前者肺轉移率100%，后者40%；從生長速度上，前者細胞倍增時間較后者短；穿透人工基底膜能力前者較后者大；前者均較后者活 力強、代謝旺。傳代至20代后，兩種形態學特征及生長速度方面均較穩定。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉移潛能的HCCLM3細胞系。

4.HepG2人肝丹細胞瘤

1979年，從阿根廷一名15歲高加索男孩的原發性肝胚細胞瘤中分離出并建立，該細胞系呈上皮樣，貼壁抱團生長，生長較快,傳代周期為1-2d， 低轉移，裸鼠中成瘤率較差，AFP 陽性， HBsAg陰性，然而目前尚未證明該細胞中有乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）基因組；但通過實驗已證實,該細胞系分化程度較高，細胞里代謝酶的生物轉化特性較完整，不需加入外源性活化系統。在藥物作用相關研究中代謝酶保持穩定，不會因傳代次數增多而有所改變，所含有的生物轉化代謝酶與人正常肝實質細胞同源，因此，常被用于體外肝細胞代謝或遺傳毒性試驗方面的理想細胞系。

其中，HepG2.2.15 是目前應用較為廣泛的細胞株，它是HepG2的衍生物是體外篩選抗HBV藥物的良好模型，并用于抗HBV新藥開發的體外研究工具。

5.Hep3B人肝癌細胞株

Hep3B分離自8歲美國黑人男童的肝癌組織。細胞形態跟HepG2類似，呈上皮細胞，電鏡下觀察胞漿里面很多粗大的黑顆粒，同樣喜抱團貼壁生長，其在裸鼠中能致瘤，但基本不轉移。HBV陽性，這與HepG2不同，這株細胞整合了完整的HBV基因組，可用于HBV感染后發展致癌相關研究。

6.Huh-7人肝癌細胞株

Huh-7細胞系于1982年從一名患有肝癌的57歲日本男性肝癌組織標本上培養而得。該細胞AFP陽性，高度分化，細胞呈上皮樣，貼壁生長，特點是HBV陰性,而具有內型肝炎病毒（hepatitis C  virus，HCV）易感性，故可用于HCV與肝癌的關系的研究。除了用于研究致癌性，還用于基因表達的調節機制、新陳代謝及VLDL的分泌等。此細胞系的特別之處如下：可用于生產重組蛋白如促紅細胞生成素；在蛋白質生物學方面用于研究在肝細胞內復制的登革病毒；廣泛用于異種移植動物模型。

7.PLC/PRF/5 人肝癌亞歷山大細胞

PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細胞于1976 年建系，細胞來自一位患有原發性HCC的莫桑比克男性患者的標本，為上皮樣貼壁生長， AFP陽性，不產生白蛋白，分泌ad亞型的HBsAg而不產生HBcAg或HBeAg和Dane顆粒，卻可維持HAV的繁殖，該細胞可能含有全部HBV基因組，同工酶譜及核型與人類同源；裸鼠異種移植可致瘤。此細胞系因其產生HBsAg的物理化學和免疫化學特性跟HBV攜帶者血清中HBsAg相似，因此，可被用來研究HBV體外病毒及其與原發性肝癌的關聯,抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備及抗病的制備等方面。

人肝癌細胞系具有以下優點

首先，在選擇實驗對象的比較上，人肝癌細胞系相較于人原代肝細胞，克服了人原代肝細胞來源困難、實驗難控制、存活時間短的局限，肝癌細胞系為已獲得的穩定傳代的細胞，具有來源方便、操作簡單、條件可控和可重復等優點，是用于肝癌疾病相關研究的理想對象。

其次，肝癌細胞系均選擇來源于確診肝癌患者的病理組織，具有與肝癌患者體內相似的遺傳基因組，其發生發展機制、功能蛋白表達、病毒復制能力、侵襲轉移功能及抗藥性等，具有與人類親源體極其相近的特點，因此更適合應用于肝癌各領域的研究.

人肝癌細胞系選擇

那么人肝癌細胞株如何選擇呢？一方面你可以查找相關的文獻，另一方面可以考慮選擇幾株常用的肝癌細胞株，然后進行驗證，如WB、QPCR驗證目標基因的情況，從而選擇一株最佳的細胞來完成后期的研究。