超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產生的一種自由基，可攻擊生物大分子，如脂質、蛋白質、核酸和聚不飽和脂肪酸等

，使其交聯或者斷裂，引起細胞結構和功能的破壞，與機體衰老和病變有很密切的關系，清除超氧陰離子自由基的研究已經得

到了廣泛的關注。生物體內的分子氧可以經過單電子還原轉變為超氧陰離子自由基(O2-)，O2-既可以直接作用于蛋白質和核酸

等大分子，也可以衍生為羥自由基、單線態氧、過氧化氫及脂質過氧物自由基等對細胞結構和功能具有破壞作用的活性氧。

超氧陰離子自由基檢測試劑盒(磺胺微板法)又稱超氧陰離子產生速率檢測試劑盒，其檢測原理是在酸性條件下

，2份O2-與羥胺反應生成1份NO2-，NO2-在對氨基苯磺酸和萘胺的作用下反應生成粉紅色的偶氮物質，

以酶標儀測定530nm處吸光度，在一定范圍內顏色深淺與O2-成正比，根據A530及NO2-和O2-的相關反應中物質的量的關系，

可算出樣品中O2-的濃度，主要用于測定植物組織中的超氧陰離子自由基含量或超氧陰離子的產生速率。

該試劑盒僅用于科研領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

操作步驟(僅供參考)：

自備材料：

1、蒸餾水

2、電子天平、研缽或勻漿器、離心管或試管

3、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋、酶標儀、酶標板

操作步驟(僅供參考)：

1、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉，加入2.5ml PAL Lysis Buffer，冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿，4℃ 10000r/min

離心15~20min，留取上清液，-20℃凍存，用于苯丙氨解氨酶的檢測。

②血漿、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定，-20℃凍存，用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液，如果有必要需進行適當勻漿，4℃ 10000r/min離心15~20min，取上清液，

-20℃凍存，用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶，可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當的稀釋。

2、PAL加樣∶

取96孔板，按照下表設置對照孔、測定孔，溶液應按照順序依次加入，并

注意避免產生氣泡。如果樣品中的PAL活性過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設置2平行孔，

求平均值。

加入物（μl）對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調零)，酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h，立即加入10μl PAL終止

液終止反應(備選方案)，以對照孔為對照調零，酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1)。

注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟，可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調零，酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑，同時需避免反復凍融。

2、獲得上清液為PAL酶液，應盡快檢測，亦可-20°℃保存。

3、如果沒有可測定紫外區的酶標儀和酶標板，也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿，但應注意比色杯的最小檢測體積。

4、每次檢測指標不宜過多，否則操作時間不一，有可能導致樣本間的差異。5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

超氧陰離子自由基檢測試劑盒(磺胺微板法)更多產品咨詢：

YS1189肌酐(Cr)檢測試劑盒(PA速率比色法)

YS1191肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點微板法)

YS1193肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點比色法)

YS1195尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸微板法)

YS1197尿酸(UA)檢測試劑盒(磷鎢酸比色法)

YS1238甘油三酯(TG)檢測試劑盒(乙酰丙酮微板法)

YS1239甘油三酯(TG)檢測試劑盒(乙酰丙酮比色法)

YS1241甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP單試劑微板法)

YS1243甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP單試劑比色法)

YS1245甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP雙試劑微板法)

YS1247甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP雙試劑比色法)

YS13555′-核苷酸檢測試劑盒(過碘氧化法)

YS2023維生素B1檢測試劑盒(熒光光度法)

YS2025維生素B2檢測試劑盒(熒光光度法)

YS2031維生素C檢測試劑盒(磷鉬酸微板法)

YS2033維生素C檢測試劑盒(磷鉬酸比色法)

YS2034維生素C檢測試劑盒(銅氧化微板法)

YS2035維生素C檢測試劑盒(銅氧化比色法)

YS2038維生素C檢測試劑盒(菲咯啉微板法)

YS2039維生素C檢測試劑盒(菲咯啉比色法)

YS2041脫氫抗壞血酸(DHA)檢測試劑盒(菲咯啉比色法)

YS2045維生素C檢測試劑盒(碘量滴定法)

YS2055還原型維生素C檢測試劑盒(二氯酚靛酚滴定法)

YS2057還原型維生素C檢測試劑盒(二氯酚靛酚比色法)

YS2113可溶性果膠(SP)檢測試劑盒(咔唑比色法)

YS2121原果膠(PP)檢測試劑盒(咔唑微板法)

YS2123原果膠(PP)檢測試劑盒(咔唑比色法)

52719P52719pCMV-EGFP-STUB1(human)-3×FLAG-Neo

52720P52720pPGK-Fluc-DIABLO(AQhuman)-3UTR-hRluc-Neo

52721P52721pHAGE-CMV-3×HA-EEA1(human)-Hyg

52722P52722pCMV-CEP19(human)-EGFP-Neo

52723P52723pCMV-NPC1L1(human)-mCherry-Neo

52724P52724pmini35S-Rluc-CmR

52725P52725pLV3-U6-DUOXA1(human)-shRNA2-CopGFP-Puro

52726P52726pLV3-U6-FDX1(human)-shRNA2-CopGFP-Puro

52727P52727pLV3-U6-FDX1(human)-shRNA1-CopGFP-Puro

52728P52728pLV3-U6-PGM5-AS1(human)-lncRNA-shRNA3-CopGFP-Puro

52729P52729pLV3-U6-DUOXA1(human)-shRNA1-CopGFP-Puro

52730P52730pLV3-U6-PGM5-AS1(human)-lncRNA-shRNA2-CopGFP-Puro

52731P52731pLV3-U6-SLC1A3(human)-shRNA1-CopGFP-Puro

52732P52732pLV3-U6-DUOXA1(human)-shRNA3-CopGFP-Puro

52733P52733pLV3-U6-BUD23(human)-shRNA3-CopGFP-Puro

52734P52734pLV3-U6-BUD23(human)-shRNA1-CopGFP-Puro

52735P52735pLV3-U6-BUD23(human)-shRNA2-CopGFP-Puro

52736P52736pLV3-U6-CCNE1(human)-shRNA4-Puro

52737P52737pLV3-U6-KMT2D(human)-sgRNA4-Cas9-EGFP-Puro

52738P52738pLV3-U6-Fndc5(mouse)-sgRNA1-Cas9-EGFP-Puro

52739P52739pLV3-U6-FDX1(human)-shRNA3-CopGFP-Puro

52740P52740pLV3-U6-PODXL2(human)-shRNA3-CopGFP-Puro

52741P52741pCMV-NLRP14(human)-3×FLAG-Neo

52742P52742pCMV-CHAT(human)-3×FLAG-Puro

52743P52743pLV3-U6-JAK2(human)-sgRNA1-sgRNA2-Cas9-EGFP

52744P52744pCMV-GLDN(human)-P2A-mCherry-Neo

52745P52745pLV2-CMV-TRIM41(human)-Myc-Puro