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當前位置:首頁   >  產品中心  >  常規(guī)試劑  >  試劑  >  D30039N 2.0 DNA連接酶試劑

9N 2.0 DNA連接酶試劑

簡要描述:9N 2.0 DNA連接酶試劑,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒

  • 產品型號:D3003
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2024-11-01
  • 訪  問  量:374

詳細介紹

9N 2.0 DNA連接酶試劑(又名9oN DNA Ligase)能夠催化磷酸二酯鍵的形成,使與同一互補靶 DNA 鏈雜交的兩條相鄰寡核苷酸鏈的5′-磷酸末端和3′-羥基末端通過磷酸二酯鍵相連。該酶來源于極度耐熱的海底超嗜熱古菌(Thermococcus sp.)9°N 菌株中克隆的連接酶基因,在 45℃-70℃ 范圍內均有活性。該酶進一步經基因工程基因突變,使得耐受更高的溫度,在95℃孵育5min后活性幾乎無損失,因此其適用于:

(1)高溫條件下,連接DNA鏈上的切刻位點

(2)適用LCR反應(Ligase Chain Reaction)

(3)適用MLPA反應(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification)

活性定義

1單位指 20μl反應體系中,50℃條件下,15分鐘內能使50%的1pmol的接頭片段(12 bp 粘性末端)發(fā)生連接所需要的酶量。

儲存

-20℃可保存兩年。



9N 2.0 DNA連接酶試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期)。

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應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,倒置反應管,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,雜質耐受性很好。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果。

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應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)


以 體外轉錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結束反應起

始前,下圖為 65 度反應 30min 后。

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雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,細胞系,原代細胞和培養(yǎng)試劑,重組蛋白,ELISA試劑盒、抗體、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產品歡迎咨詢。





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